Hei acolo! Dacă sunteți în domeniul neuroștiinței sau în orice domeniu conex care implică studierea țesutului cerebral, probabil că ați dat peste nevoia de a tăia secțiuni subțiri de țesut cerebral. Și unul dintre cele mai fiabile instrumente pentru această sarcină este un microtom Cryostat. În calitate de furnizor al acestor mașini uimitoare, sunt aici pentru a vă împărtăși cum să tăiați secțiuni de țesut cerebral folosind un microtom Cryostat.
Pregătirea
În primul rând, trebuie să vă asigurați că aveți toate echipamentele și materialele necesare. Pe langaMicrotom criostat, veți avea nevoie de un mediu de încorporare, cum ar fi compusul OCT (Optimal Cutting Temperature). Acest lucru ajută la menținerea țesutului creierului în poziție și îl face mai ușor de tăiat. Veți avea nevoie, de asemenea, de niște lame de sticlă curate pentru a monta secțiunile.
Înainte de a începe, este important să configurați corect microtomul Cryostat. Trebuie să vă asigurați că temperatura este setată corect. Temperatura ideală pentru tăierea țesutului cerebral variază de obicei între -18°C și -22°C. Această temperatură rece ajută la menținerea fermei țesutului și facilitează obținerea de secțiuni subțiri și uniforme. Puteți regla temperatura peMicrotom criostat cu ecran tactilfolosind cu ușurință interfața prietenoasă cu utilizatorul.
Pregătirea țesutului cerebral
Odată ce Criostatul este la temperatura potrivită, este timpul să pregătiți țesutul cerebral. Luați-vă mostra de creier și puneți-o într-o matriță mică. Apoi, turnați compusul OCT peste țesut. Asigurați-vă că țesutul este complet acoperit și orientat în modul în care doriți să fie tăiat. Puteți folosi o scobitoare sau o spatulă mică pentru a regla poziția țesutului.
După aceea, puneți matrița cu țesutul și compusul OCT în Criostat. Lăsați-l să înghețe o vreme. Aceasta durează de obicei aproximativ 15 - 20 de minute, dar poate varia în funcție de dimensiunea probei de țesut. Veți ști că este gata atunci când compusul OCT este solid și țesutul este ferm încorporat.
Încărcarea țesutului pe microtom
Acum că țesutul dvs. este înghețat și gata, este timpul să îl încărcați pe microtomul Criostat. Deschideți suportul pentru specimen de pe microtom. Scoateți cu grijă blocul de țesut înghețat din matriță și puneți-l în suportul pentru specimen. Asigurați-vă că este bine fixat.
Apoi, va trebui să atașați o lamă la microtom. Există diferite tipuri de lame disponibile, dar pentru tăierea țesutului cerebral, o lamă ascuțită de unică folosință funcționează de obicei cel mai bine. Urmați instrucțiunile de pe microtom pentru a instala corect lama.
Setarea parametrilor de tăiere
Înainte de a începe tăierea, trebuie să setați parametrii de tăiere. Aceasta include grosimea secțiunilor pe care doriți să le tăiați. Pentru țesutul cerebral, o grosime comună este de aproximativ 10 - 20 de micrometri. Puteți regla setarea grosimii peCriotom.
De asemenea, trebuie să setați viteza de tăiere. O viteză mai mică este de obicei mai bună pentru a obține secțiuni de înaltă calitate. Puteți experimenta puțin pentru a găsi viteza care funcționează cel mai bine pentru țesutul și lama dvs.
Tăierea Secțiunilor
După ce ați setat parametrii, este timpul să începeți tăierea. Porniți microtomul și lăsați-l să înceapă să facă secțiuni. Pe măsură ce lama taie prin țesut, veți vedea secțiuni subțiri ieșind. Puteți folosi o perie mică pentru a ridica ușor secțiunile de pe lamă și a le așeza pe lamele de sticlă.
Este important să aveți răbdare și să urmăriți procesul de tăiere. Dacă observați probleme, cum ar fi secțiunile care nu ies uniform sau ruperea țesuturilor, poate fi necesar să ajustați parametrii de tăiere sau să verificați lama.
Montarea și depozitarea secțiunilor
După ce ați tăiat secțiunile, trebuie să le montați pe lamele de sticlă. Puteți folosi un mediu de montare pentru a atașa secțiunile pe diapozitive. Asigurați-vă că secțiunile sunt plate și că nu există bule de aer.
Odată ce secțiunile sunt montate, le puteți depozita într-o cutie glisantă într-un congelator. Acest lucru va menține secțiunile în stare bună până când sunteți gata să le utilizați pentru analize ulterioare, cum ar fi colorarea sau microscopie.
Depanare
Uneori, lucrurile nu merg atât de bine pe cât ne-am dori. Iată câteva probleme frecvente și cum să le remediați:
Secțiunile sunt prea groase sau prea subțiri: Dacă secțiunile sunt prea groase, puteți reduce setarea grosimii de pe microtom. Dacă sunt prea subțiri, măriți setarea.
Țesutul se rupe: Acest lucru s-ar putea datora unei lame tocite. Înlocuiți lama cu una nouă. De asemenea, s-ar putea ca țesutul să nu fie suficient de înghețat. Pune-l înapoi în Criostat pentru un pic mai mult.
Secțiunile sunt încrețite: Acest lucru se poate datora faptului că viteza de tăiere este prea mare. Reduceți viteza de tăiere și încercați din nou.
De ce să alegeți microtomele noastre cu criostat
În calitate de furnizor de microtome Cryostat, oferim mașini de înaltă calitate care sunt concepute pentru a vă ușura viața. NoastreMicrotom criostat cu ecran tactilare o interfață ușor de utilizat, care vă permite să setați cu ușurință temperatura, grosimea de tăiere și viteza. TheCriotomeste, de asemenea, foarte fiabil și poate produce secțiuni consistente, de înaltă calitate.
Dacă sunteți în căutarea unui microtom Cryostat, ne-ar plăcea să discutăm cu dvs. Indiferent dacă sunteți un laborator de cercetare, o universitate sau o unitate medicală, vă putem oferi echipamentul potrivit nevoilor dumneavoastră. Contactați-ne pentru a începe o conversație despre cerințele dvs. și să vedem cum vă putem ajuta să obțineți cele mai bune rezultate în experimentele de tăiere a țesutului cerebral.
Referințe
- Principiile microtomiei. (Autor necunoscut). Câteva linii directoare generale privind utilizarea microtomilor în cercetarea biologică.
- Manual de utilizare a criostatului. (Manualul companiei noastre). Instrucțiuni detaliate despre operarea microtomilor Criostat.